Dit onderzoek is ontworpen met het doel om Chitosan (CH) films te formuleren door verknoping met natriumcitraat (Nacit), natriumtripolyfosfaat (NaTPP) of Chondroïtinesulfaat (CS) die in staat zijn om de in vitro permeatie van model polair geneesmiddel, 5-Fluorouracil (5-FU) en niet-polair geneesmiddel, Indomethacine (INDO) over ratten/rabbits of menselijke epidermis te simuleren. Optimalisatie ontwerp werd gebruikt om te identificeren en te optimaliseren verschillende proces-en formuleringsvariabelen aanzienlijk (p <0.05) invloed op de permeatie van beide geneesmiddelen over deze films. Verder werden de resultaten geëvalueerd voor het effect van cross linking dichtheid op in vitro permeatie met behulp van atomaire absorptiespectroscopische analyse voor Na+, DSC en IR-spectroscopische analyse. De in vitro permeatie van zowel 5-FU als INDO over geoptimaliseerde filmformuleringen van films gekruist met CH-NaTPP, CH-Nacit of CH-CS bleek vergelijkbaar te zijn met die verkregen over ratten-, konijnen- en menselijke epidermale platen. Deze resultaten geven aan dat deze geoptimaliseerde CH-films een potentieel hebben om te worden ontwikkeld als vervanging voor dierlijke en menselijke kadaver epidermale bladen voor voorlopige in-vitro permeatie studies.